Cómo Cultivar Micelio en Grano Desde una Placa Petri: Guía Completa

Expandir micelio sobre grano esterilizado es un paso crucial en el cultivo de hongos.
En este artículo te guiaremos a través del proceso partiendo de una placa Petri con micelio desarrollado y brindándote consejos útiles para asegurar un crecimiento saludable y vigoroso del micelio en el grano. 

Materiales Necesarios

1. Placa Petri de 60 mm colonizada con micelio.
2. Grano (como trigo, arroz integral o avena).
3. Autoclave u olla a presión.
4. Agua destilada.
5. Frascos de vidrio con tapas con microfiltro o bolsas de cultivo con parche de microfiltro.
6. Campana de flujo laminar, SAB o una caja de guantes esterilizada.
7. Alcohol isopropílico al 70%.
8. Cuchilla estéril o bisturí.
9. Mechero Bunsen.
10. Guantes de látex o nitrilo.
11. Cinta microporosa.

Preparación del Grano

1. Selección del grano: Elegir un grano adecuado como trigo, arroz o avena. Estos granos son populares por su capacidad de aportar los nutrientes necesarios para el crecimiento del micelio.
2. Hidratación del grano: Remojar el grano en agua durante 12-24 horas. Este paso es crucial para asegurar que el grano tenga suficiente humedad para soportar el crecimiento del micelio.
3. Cocción del grano: Cocinar el grano hidratado hasta que esté al dente. ¡Atención! el grano debe estar blando pero no demasiado cocido, ya que el exceso de humedad puede promover el crecimiento de contaminantes.
4. Secado superficial: Escurrir el grano y dejarlo secar superficialmente. Esto ayudará a prevenir el exceso de humedad en el frasco o bolsa de cultivo.

Esterilización del Grano

1. Empaque del grano: Colocar el grano en frascos de vidrio o bolsas de cultivo, llenando aproximadamente 2/3 de su capacidad si son frascos o 2/5 si son bolsas con microfiltro.
2. Esterilización: Esterilizar el grano en una olla autoclave a 15 psi durante 60 minutos. Si se utiliza olla a presión aumentar este tiempo a 2 horas. Este paso es fundamental para eliminar cualquier contaminante que pueda competir con el micelio.
3. Enfriamiento: Dejar que los frascos o bolsas se enfríen completamente antes de proceder con el siguiente paso.

Inoculación del Grano con Micelio

1. Preparación del área de trabajo: Es fundamental asegurar que el área de trabajo esté estéril. Puede utilizarse una campana de flujo laminar, SAB (Still Air Box, es decir una caja con agujeros para introducir las manos) o una caja de guantes esterilizada (glovebox). En el caso de no contar con ninguno de estos elementos, la inoculación puede hacerse en la zona de la cocina, con la mesada perfectamente desinfectada e inoculando cerca de las hornallas encendidas al mínimo.
2. Desinfección: Limpiar manos, herramientas y superficies con alcohol isopropílico de 70º.
3. Corte del micelio: Usando una cuchilla estéril y flameando en cada paso, cortar trozos de micelio de 1cm2 de la placa Petri.
4. Transferencia del micelio: Añadir un trozo de micelio por cada 125 ml de grano esterilizado. En un envase de medio litro de capacidad quedarán alrededor de 2 o 3 trozos. Se recomienda trabajar rápido y con precisión, manteniendo el área lo más estéril posible para evitar contaminaciones.
5. Sellado: Cerrar los frascos o bolsas de cultivo y sellar con cinta microporosa de ser necesario para permitir el intercambio de gases.

Incubación

1. Temperatura: Incubar los frascos o bolsas en un lugar oscuro a una temperatura de 25°C.
2. Observación: Revisar periódicamente el crecimiento del micelio. En unos días, deberías ver el micelio extendiéndose por el grano.
3. Agitación: Si se utilizan frascos de vidrio (y en caso de ser necesario), agitar suavemente a los 7 días para redistribuir el micelio y acelerar la colonización.

Consejos y Trucos

• Esterilidad: Mantener siempre la esterilidad durante todo el proceso para evitar la contaminación.
• Hidratación: No sobrehidratar el grano; la humedad excesiva puede causar contaminación.
• Paciencia: La colonización completa puede tardar hasta 3 semanas; sé paciente y no apresures el proceso.
• Condiciones óptimas: Mantener condiciones estables de temperatura para el mejor crecimiento del micelio.

Expandir micelio sobre grano esterilizado partiendo de una placa Petri es un proceso meticuloso pero gratificante. Siguiendo estos pasos y consejos podrás cultivar un micelio saludable que servirá como base para tu cultivo de hongos. Ya no tenés excusa para comenzar a cultivar tus propias setas ¡Adelante con ello! Si necesitás placas Petri de tu especie favorita, consultá el catálogo de nuestra tienda online en Argentina.